Cariótipo Sindrome De Down

Entendendo o cariótipo na síndrome de Down na prática

O cariótipo da síndrome de down se resume à trissomia do cromossomo 21. Três cópias em vez de duas. O laudo que você vê no papel mostra 47,XX,+21 para mulheres ou 47,XY,+21 para homens. A parte técnica é simples, mas o que acontece no laboratório antes de chegar nesse resultado é onde mora a dificuldade real. Cultivo de linfócitos sanguíneos com fito-hemaglutinina, parada com colcemida por volta de 72 horas, hipotonia com cloreto de potássio 0,075M, fixação com metanol e ácido acético na proporção 3:1. Se você exagerar na hipotonia, os cromossomos incham demais e se desfazem na lavagem. Se for pouco, eles ficam contraídos e você não consegue distinguir os bandas. Eu já perdi uma amostra inteira por isso, conta-gotas mal calibrado, sem perceber no primeiro enxágue.

cariótipo sindrome de down: análise e interpretação

Depois da preparação, o técnico captura imagens das metáfases, seleciona as melhores células, organiza os pares cromossômicos e monta o cariótipo. Hoje em dia a maioria dos laboratórios usa softwares como SmartKaryo, CytoGenetics ou similares, mas a conferência final é sempre humana. O software erra, especialmente em cópias de número baixo. Um operador treinado identifica o cromossomo 21 extra com muito mais assertividade do que o algoritmo sozinho. Aqui vai algo que muita gente não sabe: nem toda trissomia 21 é igual. Cerca de 95% dos casos são a trissomia livre clássica, que aparece como 47,XX,+21 ou 47,XY,+21 no cariótipo. Os outros 5% se dividem em translocação e mosaicismo. O mosaicismo é particularmente chato porque em algumas células o cromossomo extra está presente e em outras não. Você precisa analisar pelo menos 20 a 30 células para ter confiança, e alguns laboratórios param em 20 células e passam algo que pode ser falso negativo. Eu vi isso acontecer com um paciente adolescente que tinha fenótipo leve e o laudo anterior dizia «cariótipo normal». Refiz a análise em 50 células e encontrei mosaicismo 46/47 em aproximadamente 30% das células analisadas. O laudo corrigido mudou a conduta clínica. Translocação Robertsons é outro cenário que exige atenção. Geralmente envolve o braço longo do cromossomo 21 ligado a outro cromossomo acrocêntrico, frequentemente o 14. O cariótipo fica 46,XX,der(14;21)(q10;q10),+21. O número total de cromossomos parece normal — 46 — mas o paciente tem material genético extra do 21. Sem olhar o cariótipo completo e sem conhecimento da história familiar, esse caso pode passar despercebido. O teste rápido por FISH confirmando sequência do 21 daria positivo, mas sem o cariótipo completo você não saberia que é uma translocação hereditária. Nesse ponto, o aconselhamento genético dos pais é obrigatório, porque um deles pode ser portador equilibrado da translocação.

Para diagnóstico pré-natal, a coleta depende da época gestacional. Amniocentese a partir da 15ª semana ou biópsia de vilo corial na 10ª a 12ª semana. O tempo de cultura para amniócitos costuma variar de 5 a 10 dias. Vilo corial cresce mais rápido, mas tem o risco de CIVD — falsa mosaicismo placental. Já tive caso em que o CVS mostrou 47,XY,+21 em todas as células, mas a amniocentese posterior veio 46,XY normal. O bebê nasceu sadio. Isso é importante: o CVS não diagnostica o feto diretamente, diagnostica a placenta, e em cerca de 1% a 2% dos casos há discrepância. O laudo sempre precisa mencionar essa limitação. O método alternativo mais usado hoje é o QF-PCR ou a microarrays array CGH. O QF-PCR é rápido, entrega resultado em 24 a 48 horas, e detecta trissomias 21, 18 e 13 com alta sensibilidade. A desvantagem é que ele não detecta mosaicismo baixo e não identifica translocações balanceadas. O array CGH é mais sensível para microdeleções e microduplicações, mas também não vê rearranjos balanceados e tem custo significativamente maior. Nenhum dos dois substitui o cariótipo convencional quando o objetivo é o diagnóstico completo. Questão prática que todo mundo esquece: a qualidade da amostra. Pacientes com leucemia, infecções graves ou que estavam em quimioterapia recente podem ter culturas que não crescem. Já fiz cariótipo com falha de cultura porque a contagem de linfócitos estava alterada. Nesse cenário, a alternativa é pedir biópsia da medula óssea ou, no pré-natal, recorrer ao amnio após tentativa frustrada. Não adianta insistir na mesma coleta três vezes sem avaliar o contexto clínico do paciente.

Outro ponto técnico: o intervalo de bandas. O cariótipo convencional resolução média é de 400 a 550 bandas por metafase. Isso significa que você consegue detectar anormalidades acima de 5 a 7 Mb. Duplicações menores que isso passam batido. Se o paciente tem fenótipo sugestivo mas o cariótipo é normal, o próximo passo lógico é array CGH, não repetir o cariótipo. Repetir só perde tempo e dinheiro. No laudo final, a nomenclatura ISCN deve ser seguida rigorosamente. 47,XX,+21[20] significa 20 células analisadas, todas com a trissomia. Se forem 46,XX[15]/47,XX,+21[5], aí é mosaicismo e precisa constar a proporção. Laudos ambíguos como «provável trissomia» sem a contagem celular definida são inúteis clinicamente. Eu recomendo sempre exigir a descrição completa: número de células analisadas, número de células com a anomalia e a nomenclatura ISCN correta. Resumindo o que importa na prática: o cariótipo é o padrão-ouro para diagnóstico da síndrome de Down, mas exige amostra viável, cultura adequada, análise de múltiplas células e interpretação humana qualificada. Métodos moleculares são complementos, não substitutos. Mosaicismo e translocação são os verdadeiros desafios, e a omissão deles no laudo pode mudar toda a conduta genética da família.